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?放入液氮罐中的組織如何復(fù)蘇
時間:2024-02-29 13:17來源:原創(chuàng) 作者:小編 點(diǎn)擊:
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放入液氮罐中的組織復(fù)蘇的步驟如下：
將凍存的細(xì)胞從液氮罐中取出，注意迅速且要保護(hù)好自己，防止低溫傷害和可能的爆炸風(fēng)險。一種推薦的操作方法是在地面或是桌面上鋪兩層干凈吸水紙，將取出的凍存管放到吸水紙上，放平后液氮會快速從管縫隙中滲漏出來。
將凍存管放入37°C的水浴中進(jìn)行融化，輕柔晃動以加速融化，直到小瓶中只剩下一小塊冰，這個過程應(yīng)控制在1分鐘內(nèi)完成。
用70%乙醇擦拭凍存管外部后，轉(zhuǎn)移到無菌操作臺中。在打開瓶蓋前，用酒精燈火焰對瓶口進(jìn)行消毒。
將預(yù)加熱的新鮮完全培養(yǎng)基滴入凍存管中，然后用移液槍吸取瓶中液體至離心管中，加入適量濃度和體積的完全培養(yǎng)基，輕柔混合均勻。
進(jìn)行細(xì)胞懸浮液的離心，速度和時間因細(xì)胞類型而異。離心后棄掉上清，加入新鮮完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。
將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)容器和推薦的培養(yǎng)環(huán)境中進(jìn)行培養(yǎng)。在培養(yǎng)過程中，應(yīng)盡量維持高密度以提高細(xì)胞存活率。
請注意，整個操作過程中必須保持無菌，以避免細(xì)胞污染。同時，所有步驟都應(yīng)在合適的溫度和環(huán)境下進(jìn)行，以保證細(xì)胞的活力和復(fù)蘇的成功率。
